一、高效高效液相色谱法概述

高效液相色谱法（highperformanceliquidchromatogra：phy，液相HPLC）是色谱20世纪60年月末期，在典型液相柱色谱的高效根基上，引入了气相色谱的液相实际以及技术，并加以改善而睁开起来的色谱新型高效分拉拢成技术。它是高效指行动相为液体的色谱技术，接管低压泵、液相小颗粒高效牢靠相以及高锐敏度检测器，色谱实现为了合成速率快、高效分说功能高以及操作自动化。液相低压是色谱高效液相色谱法的突出特色，零星内压力可达15～35MPa。高效由于行动相流经色谱柱时，液相柱内填料详尽，色谱受到阻力很大，为使行动相照料组分快捷经由色谱柱，进入检测室，就必需对于行动相施以低压。由于化学键合牢靠相的泛起，使高效液相色谱柱效力、分说功能大猛后退。

高效液相色谱法是农药残留合成不可缺少的本领。高效液相色谱仪也是农药残留合成试验室必备的仪器配置装备部署之一。它处置了热晃动性差、难于气化、极性强的农药残留合成下场，随着高锐敏、通用型检测器的乐成开拓及运用，能胜任绝大少数农药残留合成使命。

（一）高效液相色谱法的特色

一、高效：由于运用了细粒度的高效填充柱战争均填充技术，高效液相色谱法分说功能极高，柱效力艰深可达每一米10“实际塔板数。商品化的尚有微型填充柱（内径为l妹妹）以及毛细管液相色谱柱（内径为0．05妹妹），柱效力逾越了每一米10。实际塔板数，可能实现极为实用的分说。

二、高速：由于运用低压泵输送行动相、接管梯度洗脱装置、用检测器在柱后直接检测

洗出液成份等原因，高效液相色谱法完因素辩合成的光阴惟独多少分钟到多少颇为钟，比典型液相色谱法要快良多。

三、高锐敏度：紫内线、荧光、电化学、质谱等高锐敏度检测器的运用，使其锐敏度与气相色谱（GC）相挨近。

四、高度自动化：先进的高效液相色谱仪配有合计机，不光可能自动处置数据、打印合乐成果，而且可能对于仪器的全副操作搜罗行动相、流速、柱温、检测器波长的抉择，以及进样、梯度洗脱方式等妨碍挨次操作，成为全自动化的仪器配置装备部署。

五、不受合成试样挥发性以及相对于份子品质的限度：可用于分说高沸点、相对于份子品质大、热晃动性差的农药残留及其代谢物的检测。

艰深来说，高效液相色谱法的缺少是比气相色谱法合成老本高（行动相、光源灯、色谱柱的破费）、倾向率高，工效也稍低。

（二）高效液相色谱法的根基规范

液相色谱法主要分为2种规范：平面色谱（薄层色谱、纸色谱）以及柱色谱。柱色谱可分为典型柱色谱（低压）以及高效液相色谱（低压）。高效液相色谱法又可分为液固吸附色谱法（1iquidsolidadsrptionchromatogtaphy，LSC）、液液调配色谱法（1iquid-liquidpartitionchromatography，LLC）【次若是键合相色谱法（bonded-phasechromatography，BPC）】、离子交流色谱法（ion-excharlgechromatogry，IEC）、空间排阻色谱法（spatialexclLlSlOnchromatography，SEC）。与典型的柱色谱法差距，高效液相色谱法接管低压泵、填充微粒牢靠相的短柱，而且随着组分的流出检测器发生信号并记实下来。高效液相色谱法道理与典型的柱色谱法相同，它的后退主要依赖于色谱仪硬件的开拓。低压泵能保障当压力不断飞腾的情景下，流量的精度不变更，同时有大批的种种规范以及规格的色谱柱供选用。

高效液相色谱法分说方式可分为4种根基方式。建树农药残留合成的高效液相色谱措施，选用哪种分说方式取决于农药的化学份子妄想、性子以及对于样品中所含有的干扰物资的分说。艰深地，高效液相色谱法合成测定农药残留量以液液调配色谱的键合相色谱法最为罕用。凭证牢靠相以及行动相相对于极性有2种操作方式，一种是正相色谱法（normal—phasechromatography，NPC），另一种是反相色谱法（reverse—phasechromatogra—phv，RPC）。正相色谱法的牢靠相极性比行动相大，非极性组分先流卓越谱柱；随着行动相极性的后退，被合成的组分保存光阴延迟。正相色谱法的短处是疗营养辩抉择性时溶剂抉择规模宽，由于每一每一运用低黏度溶剂，柱贬低，可患上到更好的谱图；其缺陷是在某些情景下，行动相配比比例差距，失调时问较长，重现性差，行动相中低浓度的极性传染物会影响合成的锐敏度。

反相色谱法的牢靠相极性比行动相小。绝大少数极性组分先流出，随着行动相极性的削减，被合成的组分保存光阴缩短。反相高效液相色谱法是农药残留合成最罕用的一种操作方式。

一、液固吸附色谱法：液固吸附色谱法的行动相为液体，牢靠相为吸附剂。牢靠相（罕用硅胶）艰深是不包裹牢靠液的液相色谱法。样品中各组分因对于牢靠相概况吸附熏染的差距，患上以分说以及合成。色谱柱内充填固体吸附剂，运用吸附剂概况活性中间妨碍吸附，试样不进入牢靠相外部。行动相带着被测组分进入色谱柱时，吸附剂不光对于差距的组分具备差距的吸附力，而且对于行动相份子也具备确定的吸附熏染，在吸附剂概况各组分份子之间及各组分份子与行动相份子之间爆发吸附相助，保存值由这两个因素抉择。

液固吸附色谱法的特色：适宜可溶于有机溶剂的非离子型化合物的分说，特意是异构体及具备差距极性的取代基的化合物分说；适宜于合成非极性以及中性化合物，极性化合物可能在色谱柱上发生不可逆的吸附；合乐成果一再性差，柱晃动性欠好；样品组分吸附在吸附剂的活性部位有演化以及损失的可能。这种措施在农药残留合成上较少运用。

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